Sterilisatie -werkzaamheid Verificatie van autoclaven

Een van de meest essentiële instrumenten in een laboratorium voor microbiologie is de sterilisator, waarbij de autoclaaf (hogedrukstoomsterilisator) het meest wordt gebruikt. Volgens GB 4789.1-2016 moet laboratoriumapparatuur regelmatig worden geïnspecteerd en/of gekalibreerd (met inspectietags), onderhouden en onderhouden om de juiste prestaties en operationele veiligheid te garanderen. Maar heeft uw autoclaaf dergelijke inspecties ondergaan? En als u verificatie wilt uitvoeren, hoe moet u dit dan doen? Vandaag zullen we de belangrijkste methoden samenvatten voor het verifiëren van de sterilisatie -werkzaamheid van autoclaven.

Verificatie van autoclaaf-sterilisatie-werkzaamheid omvat in het algemeen methoden zoals chemische indicator, maximale thermometer, zelfgemaakte temperatuurbuis en biologische indicator. Hoewel deze methoden vergelijkbare principes delen - vooral bevestigen of de sterilisator de vereiste temperatuur bereikt tijdens sterilisatie - kunt u een of meer kiezen op basis van de specifieke omstandigheden van uw laboratorium.

1. Chemische indicatiemethode

Principe: chemische indicatoren ondergaan een kleur- of vormverandering onder specifieke temperatuur- en tijdomstandigheden. Deze wijziging wordt gebruikt om te bepalen of aan de sterilisatieparameters is voldaan.

Een veelgebruikt item in laboratoria is de 3M Autoclave -indicatortape, die van kleur verandert na sterilisatie. De tape is gemaakt van thermosensitieve chemicaliën, kleurontwikkelaars en verfmaterialen, gedrukt in een streeppatroon op lijmband. Het wordt direct toegepast op de buitenkant van het sterilisatiepakket, met een minimale lengte van 5 cm. Druk licht op de tape om een ​​goede hechting en afdichting te garanderen. Nadat ze gedurende 20 minuten of 130 ° C gedurende 4 minuten zijn blootgesteld aan 121 ° C, moeten de diagonale witte strepen op de tape volledig zwart worden. Als de kleurverandering ongelijk of onvolledig is, wordt het pakket niet correct gesteriliseerd.

2. Maximale thermometermethode

Principe: deze methode maakt gebruik van een kwikthermometer die niet terugkeert naar een lagere temperatuur zodra hij is verwarmd, vergelijkbaar met een traditionele medische thermometer. Het geeft de maximale temperatuur aan die wordt bereikt tijdens sterilisatie.

Plaats voor verificatie de kwikthermometer in een met water gevulde Erlenmeyer-kolf. Plaats tijdens sterilisatie de kolf op de bovenste en onderste delen van de autoclaaf. Controleer na het proces of de lezing van de thermometer overeenkomt met de vereiste temperatuur. Deze methode kan alleen de temperatuur verifiëren en kan niet bevestigen of aan de vereiste van de sterilisatietijd is voldaan, dus het vertegenwoordigt de minimale standaard voor autoclaaf -verificatie.

3. Zelfgemaakte temperatuurbuismethode

Principe: deze methode maakt gebruik van bepaalde chemicaliën die smelten en herkristalliseren bij specifieke temperaturen, met onderscheidende kristalvormen na cooling. Deze chemicaliën worden afgesloten in kleine glazen buizen en in de autoclaaf geplaatst. Na sterilisatie wordt de kristalvorm onderzocht om te bepalen of de juiste temperatuur is bereikt.

Benzoëzuur wordt vaak gebruikt, met een smeltpunt van 121–123 ° C, die uitsluit met de standaard sterilisatietemperatuur van de autoclaaf. Vast benzoëzuur wordt verzegeld in kleine glazen buizen en in de autoclaaf geplaatst. Na sterilisatie wordt waargenomen dat de toestand van het benzoëzuur te bevestigen of de doeltemperatuur is bereikt. Net als de maximale thermometer -methode, verifieert deze benadering alleen de temperatuur, niet de duur van de sterilisatie.

4. Biologische indicatiemethode

Principe: deze methode gebruikt niet-pathogene sporen van Geobacillus stearothermophilus als indicatororganismen om de effectiviteit van thermische sterilisatie te beoordelen. Deze sporen zijn zeer warmtebestendig, met weerstand vergelijkbaar met die van pathogene Clostridium-botulinumsporen, waardoor ze geschikte indicatoren zijn voor het verifiëren van de werkzaamheid van de sterilisatie.

Biologische indicatoren zijn verkrijgbaar in drie vormen: spore-suspensies, spore-stroken en geïntegreerde spore-en-mediumbuizen. Deze worden meestal op vijf locaties in de sterilisatiecontainer geplaatst: de voorkant, het midden en de achterkant van de onderste laag, evenals de middelste punten van de bovenste en middelste lagen. Na sterilisatie worden de indicatoren geïnoculeerd in bromocresol paars-glucose-peptone water en gedurende 2-7 dagen geïncubeerd bij 55-60 ° C. Als het medium helder en ongewijzigd van kleur blijft, werden de sporen gedood, wat duidt op een goede sterilisatie. Als het medium geel en troebel wordt, overleefden de sporen, wat duidt op slechte sterilisatieprestaties. Zowel spore -ophangingen als spore -strips volgen hetzelfde validatieproces.

Commerciële biologische indicatiebuizen worden ook vaak gebruikt in laboratoria. Ze bevatten Geobacillus Stearothermophilus -sporen en een afgesloten glazen ampul met groeimedium. De buizen worden over de sterilisatiecontainer geplaatst. Na autoclaveren wordt de glazen ampoule verpletterd om het medium af te geven en wordt de buis geïncubeerd bij 56 ° C, naast een positieve controle. Als sterilisatie onvoldoende is, zullen overlevende sporen groeien en het bouillon geel worden. Als sterilisatie effectief is, zijn de sporen geïnactiveerd en blijft de bouillon paars.

Verificatiefrequentie

Momenteel is er geen strikte nationale standaard met betrekking tot de frequentie van autoclaaf -werkzaamheidsverificatie. Van laboratoria wordt verwacht dat ze hun eigen verificatieschema's vaststellen en zich strikt aan hen houden. Gezien zowel het gebruiksgemak als de betrouwbaarheid van de resultaten, raden we aan om indicator tape te gebruiken in combinatie met biologische indicatiebuizen, omdat ze een eenvoudige werking en uitgebreide verificatie van sterilisatie -effectiviteit bieden.

Opmerkingen over sterilisatie (niet vereist voor sommige geïmporteerde volledig automatische autoclaven)
Bij het gebruik van een hogedrukstoomsterilisator is het cruciaal om alle koude lucht in de kamer te verdrijven wanneer stoom wordt vrijgegeven. Pas nadat alle koude lucht is verwijderd als de uitlaatklep wordt gesloten. Als er lucht blijft, kan de drukmeter de juiste druk aangeven, maar de werkelijke temperatuur in de kamer zal tekortschieten. Hoe meer lucht wordt bewaard, hoe groter de discrepantie tussen druk en temperatuur, wat mogelijk resulteert in onvolledige sterilisatie. (Dit wordt vaak waargenomen tijdens de sterilisatie van fermentatiemedia, waarbij luchtbellen in kleine geleidingsbuizen blijven - proberen de koude lucht grondiger uit te putten.)